细菌荚膜对染料的亲和力很低,不易着色,因此常用负染色法进行染色。所谓负染色法就是用有色的背景将不着色的部分衬托出来。负染色法常用的染液是黑色素染液。
细菌芽孢不易着色,因此在染色时需要加热。
一 实验目的
掌握细菌荚膜、芽孢染色的基本技能。
二 实验材料
菌种:钾细菌斜面(28℃下培养一周)、苏芸金杆菌斜面(37℃下培养21小时左右)。
染液:藏花红染液、黑色素染液、孔雀石绿染液。
三 实验内容:
(一) 荚膜染色
1. 在洗净的载玻片中央滴一滴蒸馏水,用接种针挑取少量钾细菌,涂匀后,微热固定。
2. 滴一滴藏花红染液,染2分钟,水洗。
3. 待未干时,滴二滴黑色素染液,用吸水纸边缘将染液刮成一薄膜,自然干燥活微热烘干。
4. 用高倍镜或油镜观察背景黑色,菌体红色,荚膜不着色。
(二) 芽孢染色
1.制作苏芸金杆菌涂片,微热固定。
2.滴几滴孔雀石绿染液并放在正在沸腾的水浴锅盖上加热10分钟,这时需要不断添加染液,以免变干,水洗,烘干。
3.用藏花红复染1分钟,水洗,烘干。
4.用油镜观察菌体红色、芽孢绿色、伴孢晶体绿色、孢子囊为红色,其中的芽孢为绿色。
附:染料配制(点击展开)